System is processing data
Please download to view
...

Immunocytochemia ABC

by julita-kulbacka

on

Report

Category:

Documents

Download: 1

Comment: 0

84

views

Comments

Description

Download Immunocytochemia ABC

Transcript

Immunocytochemia ABC I DZIEŃ 1. Przepłukać w PBS (ciach - ciach) 2. 1% H2O2 – 30 min 3. Płukanie 3x5min w PBS z Tritonem (1% triton w PBS), następnie wycieram porządnie bagietkami lub ręcznikiem papierowym 4. Nakładam I przeciwciało, jedno oczko zostawiam na kontrolę negatywną bez przeciwciał i nakładam PBS (20ul minimum) – inkubacja całą noc w lodówce, na nawilżonym ręczniku papierowym pod przykryciem. II DZIEŃ 1. Płukanie 3x5 min w PBS z Tritonem – wycieram porządnie 2. Nakładam I przeciwciało z kitu DAKO – 20 min 3. Płukanie 3x5 min w PBS z Tritonem – wycieram porządnie. 4. Nakładam II przeciwciało z kitu DAKO – 20 min 5. Płukanie 3x5 min w PBS z Tritonem – wycieram porządnie. 6. Nakładam DAB (DAKO) 20-30 minut 7. Płukanie 10 w wodzie destylowanej 8. Hematoksylina 30sek- 1 min 9. Płukanie 30 min w bieżącej wodzie 10. Suszę na powietrzu 11. Szereg alkoholowy 50-100% po 3-5min w każdym 12. Ksylen ok. 5 min w każdym (I, II i III) 13. Suszymy i zamykamy DPX i nakładamy szkiełka nakrywkowe (najlepiej na folii aluminiowej i czekamy aż doschnie, następnie zacieki czyścimy ksylenem i bagietką).
Fly UP